Анализ на артрит энцефалит коз
Артрит-энцефалит коз — (АЭК), симптомокомплекс, характеризующийся развитием демиелинизирующего энцефалита, прогрессирующего артрита и интерстици-альной пневмонии. Болезнь, известная также как лейкоэнцефаломиелит-артрит коз.
Предполагается, что болезнь распространена широко, так как симптомокомплекс поражения 3-систем органов (ЦНС, суставов, легких) у коз уже описан в некоторых странах. Инфекция широко известна во Франции. Чаще вирус встречается в районах интенсивного козоводства — Европе, Австралии, США. При этом только у 1—2 % инфицированных животных поражается ЦНС и до 30—40 % (в последствии) — суставы. В Мексике обнаружили вирусные частицы ВАЭК при клиническом, серологическом, патологическом, иммуногистохимическом и ультраструктурном исследовании молочных коз. Изучали ткани после гибели животных. Исследовали синовиальные мембраны, легкие и молочные железы от коз с клинической характеристикой заболевания и содержанием специфических антител.
Болезнь широко поражает козлят в возрасте 1—5 месяцев. По клиническим признакам АЭК похож на синдром висны-маэди у овец. В ранних сообщениях эта болезнь была представлена как маэди или ППО по аналогии с аденоматозом овец, проявляется атаксией, гиперстезией, иногда лихорадкой, прогрессирующими парезами конечностей, перерастающими в параличи. Процесс чаще начинается с задних конечностей и распространяется на передние. Животные часто погибают с картиной тетраплазии. Присоединяются явления пневмонии и воспаления суставов. Яркий клинический признак — увеличение объема путового сустава. Картина крови, как правило, без изменений, иногда может наблюдаться лимфопения. В цереброспинальной жидкости отмечается плеоцитоз, в основном за счет мононуклеарных клеток, и увеличение количества белка. Течение болезни — несколько недель, исход — летальный.
Патоморфологические изменения у естественно и экспериментально инфицированных животных локализуются в ЦНС, суставах и легких. В ЦНС изменения выявляют в белом веществе головного и спинного мозга и мозжечке. Наиболее выраженные поражения чаще обнаруживаются в шейных и грудных отделах спинного мозга. Микроскопически поражения характеризуются образованием плотных периваску-лярных муфт из мононуклеарных клеток, формированием лимфоцитарных инфильтратов, пролиферации глии и выраженной первичной демиелинизацией. В тяжелых случаях участки нервных клеток замещаются глиальными рубцами. В суставах обнаруживается гиперплазия синовиальных клеток, лимфопитарная и плазмоклеточная инфильтрация. При прогрессировании болезни нарастают дегенеративные изменения, такие как фиброз, некроз, и минерализация синовильных оболочек, появляются периартикулярные коллагенозные структуры. В легких — изменения, аналогичные наблюдаемым при маэди у овец: интерстициальная пневмония, гиперплазия пери-бронхиальной лимфоидной ткани.
Вирус пребывает в латентном состоянии в предшественниках макрофагов и начинает реплицироваться в период их дифференциации. На процесс репликации вируса влияют вирусные AT и цитокины. AT к гликопротеинам одних лентивирусов нейтрализуют вирус, в то время как AT к гликопротеину других вирусов соединяются с вирионами, но не нейтрализуют их. Образовавшиеся в таких случаях комплексы вирус — АТ связываются с Fc-рецепторами макрофагов и способствуют проникновению вирусов в клетки. После проникновения в ткани инфицированные макрофаги взаимодействуют с лимфоцитами и индуцируют воспалительный каскад с дальнейшей продукцией цитокинов, которые усиливают экспрессию AT класса II — главного комплекса гистосовместимости и пролиферацию лимфоцитов В и CY. Патологический процесс, по-видимому, усиливается образованными комплексами: вирусный гликопротеин — Ig.
Вирус относится к семейству Retroviridae, близок, но не идентичен вирусу висны-маэди. По многим свойствам сходен с вирусом висны-маэди овец. Вирус, изолированный от больных коз, обладает свойствами, характерными для ретровирусов. Вирус содержит 60—70S РНК и РНК-зависимую ДНК-полимеразу, а в инфицированных вирусом культурах клеток обычно обнаруживают вирусные частицы, морфологически характерные для ретровирусов. В градиенте сахарозы его плотность составляет 1,15 г/см3, т. е. идентична плотности вируса висны-маэди.
Морфогенез вируса АЭК идентичен морфогенезу вируса висны-маэди: частицы типа С ретровируса диаметром 100—120 нм почкуются на плазменных мембранах инфицированных клеток. Почкующаяся частица содержит электронноплотную внутреннюю структуру, имеющую форму полумесяца. После созревания частицы отпочковываются в межклеточное пространство; зрелые экстрацеллюлярные вирионы имеют отчетливый промежуточный слой, электронноплотное центрально расположенное ядро.
Структурные белки АЭК очень похожи на белки вируса висны-маэди овец, а их АГ детерминанты перекрестно реагируют со структурным полипептидом рЗО вируса висны-маэди. Эти вирусы в РИД неразличимы, поэтому некоторые исследователи считают, что вирус АЭК является вариантом вируса висны-маэди овец, хотя, как установлено, они различаются по критерию гомологичности нуклеотидных последовательностей генома и являются двумя различными представителями семейства ретровирусов. Гомологичные участки геномов этих вирусов, были выявлены в районах gag и pol и небольшой области гена env, контролирующих групповую специфичность, определяемую близкими в АГ-отношении внутренними белками двух вирусов. Негомологичные участки, такие как большая область гена env, могут представлять уникальные последовательности нуклеотидов, определяющие штаммовую специфичность и клеточный тропизм. Таким образом, полученные данные хорошо коррелируют с результатами сравнительного изучения биологических свойств, указанных вирусов.
Устойчивость не изучена. Прототипные шт. — К 1514, 1736—81, 2150—81. Вышеприведенные данные о родстве вируса АЭК с возбудителем висны-маэди, вызывающим у козлят в возрасте 2—4 месяцев пневмонию и поражение ЦНС, а у взрослых особей — артрит, чаще путового сустава, подтверждаются рядом исследователей. Данный вирус более связан с вирусом висны, чем с вирусом ВИЧ. Вирус кодирует белок Rev, необходимый для эффективной репликации его в культуре клеток. Поверхностный гликопротеин gp 135 вируса АЭК формируется в результате посттрансляционной модификации гликозилированного gp 155. Установлена частичная гомология генома ВИЧ с геномами лентивирусов домашних животных: висны-маэди, АЭЕ и ИНАН. Наиболее выраженная гомология обнаружена с геномом вируса висны-маэди. Исходя из имеющихся данных о последовательностях, проведен филогенетический анализ лентивирусов мелких жвачных для фрагментов из областей env, pol, gag и LTR Дивергенция между фрагментами варьировала от 16 % в областях gag и pol до 22 % в env и 35 % в LTR. Существует как негативный, так и позитивный дарвиновский отбор в генах исследуемых лентивирусов. При построении филогенетических деревьев по относительной скорости замен применительно к позиции кодонов выявлены интересные взаимоотношения между лентивирусами овец и коз. В целом дифференцировано, как минимум, 6 разных экотипов (clades) без четкого разделения штаммов, выделенных от коз (вирус артрита-энцефалита коз) и овец (вирус маэди-висна). Филогенетические деревья, построенные на основе фрагментов из разных кодирующих областей, хорошо согласовались между собой, равно как и с деревьями, построенными с использованием других методов филогенетического реконструирования. Таким образом, получены убедительные свидетельства существования и эпидемиологического значения межвидовой трансмиссии.
Экспериментальная инфекция воспроизводится на ягнятах 1,5-месячного возраста, у которых развиваются артриты и продуцируются вирусоспецифические AT. С этой целью кровь от молодых серонегативных коз центрифугируют в растворе фи-кола с последующей адгезией в лунках пластиковых плашек, выделяют моноциты. Последние инфицируют in vitro вирусом и инокулируют козам в дозе по 105 клеток/животное. Спустя 3 месяца инфицированных животных обрабатывают гексаметазоном. Обработка обостряет течение инфекции. После ее проявления у всех коз, | инфицированных чужими моноцитами, обычно развиваются артриты и в крови появляются инфицированные моноциты; в группе коз, зараженных собственными моноцитами, только у одной из трех отмечали обострение инфекции. Таким образом, реакция хозяина на инфицированные вирусом клетки является основным фактором, определяющим экспрессию вируса АЭК. Вирус АЭК размножается in vitro в культурах клеток козьего происхождения, а также, как и изоляты вируса висны-маеди, в культурах клеток овец. Предполагают, что козлята заражаются внутриутробно или немедленно после рождения. Вирус АЭК обнаружен в молоке и молозиве инфицированных коз. Совместное содержание ягнят со взрослыми козами, инфицированными вирусом АЭК, не вело к развитию болезни у ягнят в течение 15 месяцев наблюдения. Однако вирус АЭК передается с молоком не только козлятам, но и ягнятам.
Профилактика и меры борьбы. Средства специфической профилактики АЭК не разработаны. Поэтому меры борьбы сводятся к проведению ветеринарно-санитарных мероприятий, выявлению и выбраковке больных и серопозитивнях животных. Рекомендуется изолированное содержание потомства инфицированных коз и вскармливание козлят молоком КРС или молоком коз из благополучных хозяйств. Совместное содержание коз и овец может неблагоприятно влиять на попытки искоренения двух болезней, вызываемыхретровирусами, т. е. артрита-энцефалита коз и висны-маэди овец. Козы, вакцинированные провирусной ДНК или вирионами, дефектными по гену tat (tat-), становились иммунными к патогенному вирусу дикого типа.
Источник
Вирус козьего артрита-энцефалита — Caprine arthritis encephalitis virus (CAEV).
Артрит-энцефалит коз (АЭК) — это медленно протекающее вирусное заболевание, поражающее три системы — ЦНС, опорно-двигательную (суставы) и дыхательную (легкие) у коз, овец и КРС (в основном молодняк), вызывая в последствии 100 % гибель зараженных животных.
Первыми о болезни с подобной симптоматической картиной у домашних коз сообщили D. Stavrou и другие ученые в 1969 году. С помощью бесклеточной суспензии, приготовленной из органов случайно заболевших животных,удалось экспериментально воспроизвести болезнь на козах и выделить вирус, имевший при электронно-микроскопическом исследовании морфологическое сходство с вирусом Висна-Мэди овец (ВМО).
Возбудителем АЭК является вирус с длительным инкубационным периодом, относящийся к семейству ретровирусов (Retroviridae), роду лентивирусов (Lentivirus), куда входят также антигенно и генетически родственные вирусы: висна-мэди овец, инфекционной анемии лошадей, иммунодефицита КРС, кошачьего иммунодефицита, иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) и другие.
АЭК широко распространена во всем мире, из 161 стран болезнь зарегистрирована уже в 41-ой стране Мира, особенно в странах с развитым молочным козоводством и совпадает с международным перемещением Европейских пород молочных коз, особенно из-за отсутствии обязательной диагностики данной болезни во время карантинирования коз.
Список стран: США (38-81% зараженных от общего поголовья коз), Канада, Мексика (1997), Бразилия (1996), Венесуэла (1996), Доминиканская Республика (1998), Перу, Австралия, Новая Зеландия, Фиджи, Япония (2002), Франция, Швейцария, Испания, Дания, Исландия, Италия, Германия, Лихтенштейн (2000), Норвегия, Испания (1996), Словакия (1996), Бельгия (2000), Великобритания,Венгрия (1996), Босния и Герцеговина (2005), Болгария (2001), Латвия (2002), Россия (2003), Тунис (1995), Морокко (2002), Кения, Тринидад и Тобаго (1996) и другие страны.
В России установлена циркуляция вируса АЭК среди поголовья коз и КРС на территории Московской, Липецкой, Ленинградской, Брянской, Ивановской, Калужской, Владимирской, Тверской областей РФ. Эпизоотологическое моделирование АЭК показывает, что зоны высокого риска возникновения АЭК в РФ включают Центральный, Южный, Приволжский, Северо-Кавказский, Уральский федеральные округа, а также субъекты Сибирского и Дальневосточного округов, прилегающие к южной границе страны.
Вирус АЭК поражает в основном белые клетки крови и перемещается по организму внутри этих клеток. Без клетки вирус быстро погибает. Любая секреция от инфицированного животного, которая содержит лейкоциты (молоко, кровь, слюна, слезы, слизь дыхательных путей) будет содержать вирус. Вирус также был найден в яйцеклетках и в сперме.
Он чувствителен к высоким температурам, но устойчив к низким температурам и относительно — ультрафиолетовому излучению.
После интрацеребрального, интраартикулярного или интраперитонеального заражения развиваются разного рода изменения. Через 7 дней появляются первые воспалительные повреждения в головном мозге, суставах и легких, которые сохраняются в течение 8-21 месяца, независимо от возраста животных. В лейкоцитах жизнеспособный вирус обнаруживается начиная со 2-й недели после заражения в течение всей жизни животного. Как только клетки хозяина поражаются вирусом, они остаются инфицированными в течение всей жизни хозяина. Единственный способ удаления инфекции из организма это уничтожение зараженной клетки. После заражения вирусом в организмы вырабатываются антитела, которые не обеспечивают защиту организма, но являются хорошим индикатором для диагностики заболевания. Антитела начинают вырабатываться от 2-х месяцев до 2-х лет.
Пути передачи вируса.
Основные это молозиво и сырое молоко (выпаивание, доение, молокоборудование, грязные руки дояра), но также через кровь (иглы, тату, обезроживание, машинки для стрижки, открытые раны), слюну (облизивание, корм, вода, подстилка, тесный контакт), слезы (тесный контакт, подстилка), слизь дыхательных путей (тесный контакт), секреция родовых путей (роды, кесарево сечение). Внутриутробно, через яйцеклетки, эмбрионы и сперму в меньшей степени, но возможно и доказано.
Спектр восприимчивых к вирусу АЭК животных не ограничивается парнокопытными жвачными и в эпизоотологический процесс могут вовлекаться грызуны, собаки, кошки, приматы и т д. В настоящее время доказано, что в естественных условия межвидовые передачи регулярно происходят от коз к овцам в обоих направлениях. Установлена персистенция вируса (это когда вирус находится в активном состоянии, хотя по всем срокам уже должен был исчезнуть из
организма) АЭК в течение не менее 60-ти суток в организме экспериментально зараженных мышей, что свидетельствует о возможности циркуляции его среди грызунов в природе, где они могут служить резервуаром инфекции. Получены доказательства инфицирования вирусом АЭК людей и крупного рогатого скота, особенно массово это происходит в Мексике. Среди коз более восприимчивы культурные породы, аборигенные породы имеют иммунитет.
Клинические признаки проявляются только у молодых животных (1-6 месяцев) или у животных с низким иммунитетом (плохое содержание и кормление, стрессы), что составляет около 30-35 % от общего числа зараженных животных. Остальные сероположительные животные (около 65-70%) при хороших условиях содержания и кормления остаются без проявления клинических признаков в течение многих лет (до 4-5 лет) или пожизненно, при этом они могут дальше продуктироваться и воспроизводится при соблюдении определенных условий безопасности.
Всех животных делят на 3 условные группы:
1. Отрицательная — когда животное дает не менее двух отрицательных результатов с промежутком 6 месяцев и это животное находится в благополучном стаде (без сероположительных животных в стаде) или привезенное из благополучного стада после карантина и двух подряд отрицательных результатов.
2. Неопределенная — когда животное дает то положительный, то отрицательный результат, в результате сероконверсии (от 1 до 6 месяцев) из-за беременности, другого хронического или острого заболевания, недостаточного количества антител, или животное рожденное от сероположительной матери или отца. Такие животные могут быть переведены в другой статус (отрицательный или положительный) после последующей диагностики.
3. Положительная — животное является носителем вируса после двукратного положительного теста с промежутком в один месяц. Положительных животных и их потомство уничтожают, особенно с клиническими признаками, если животное высокоценно, то создают карантинную сероположительную группу с определенными условиями содержания и размножения.
Клинические признаки возникают когда клетки, несущие латентный вирус, созревают и размножаются (от 2-х месяцев до 2-х лет) в нужных органах организма (молочная железа, легкие, оболочки сухожилий, суставы и нервная ткань), вызывая соответствующие симптомы болезни:
• вирусный мастит — увеличение лейкоцитов в молоке, гипогалактия или агалактия, синдром «жесткого вымени». Признаки: асимметрия вымени, обширные уплотнения;
• артрит — чаще у взрослых животных — 30-40% в возрасте от года и старше. Чаще поражаются запястные и скакательные суставы. Болезнь внезапная и прогрессирующая, иногда бывают рецидивы. Признаки: опухание суставов, боль при движении, хромота, нарушения позы, деформация суставов, снижение веса;
• пневмония — прогрессирующая интерстициальная. Признаки: потеря веса, одышка, не встают;
• менингит или энцефалит или миелит — чаще у молодняка (1-6 месяцев) или взрослых (1-2 %). Признаки: медленно развивающиеся парезы и параличи. Начинается с задних конечностей и переходит на передние. Отставание в росте. У взрослых может быть также слепота, тремор головы, наклоны головы, манежные движения, атрофия мышц.
Крупный рогатый скот восприимчив к заражению вирусом АЭК, болезнь протекает с характерными клиническими и патологоанатомическими признаками и вирусоносительством.
Патоморфологические изменения у естественно и экспериментально инфицированных животных локализуются в ЦНС, суставах и легких.
В ЦНС изменения выявляют в белом веществе головного и спинного мозга и мозжечке. Наиболее выраженные поражения чаще обнаруживаются в шейных и грудных отделах спинного мозга. Микроскопически поражения характеризуются образованием плотных периваскулярных муфт из мононуклеарных клеток, формированием лимфоцитарных инфильтратов, пролиферации и выраженной первичной демиелинизацией.
В тяжелых случаях участки нервных клеток замещаются глиальными рубцами. В суставах обнаруживается гиперплазия синовиальных клеток, лимфопитарная и плазмоклеточная инфильтрация. При прогрессировании болезни нарастают дегенеративные изменения, такие как фиброз, некроз, и минерализация синовильных оболочек, появляются периартикулярные коллагенозные структуры. В легких — интерстициальная пневмония, гиперплазия перибронхиальной лимфоидной ткани. Ткань легкого диффузно уплотняется и по консистенции напоминает губчатую резину.
Картина крови, как правило, без изменений, иногда может наблюдаться лимфопения. В цереброспинальной жидкости отмечается плеоцитоз, в основном за счет мононуклеарных клеток и увеличение количества белка.
Диагноз на АЭК устанавливают па основании данных эпизоотического анализа, клинического осмотра, патоморфологических данных, а также результатов лабораторных исследований.
Для обнаружения вирусоспецифических антител наибольшее распространение получили реакция диффузионной преципитации в агаре (РДП) и иммуноферментный анализ (ИФА), а для обнаружения вирусного генома используют молекулярно-бпологический метод — ПЦР.
ПЦР позволяет обнаруживать геном вируса АЭК в пробах культурального материала и крови
инфицированных животных на ранних стадиях заболевания (начиная с 45 суток) и дифференцировать его от других близкородственных ретровирусов (Мэди-Висна, аденоматоз). Данная реакция пригодна для проведения эпизоотологического мониторинга АЭК и использования при осуществлении мер борьбы с АЭК в неблагополучных хозяйствах.
Дифференциальный диагноз. В первую очередь дифференцируют от Мэди-Висна овец и коз. АЭК дифференцируют в зависимости от формы клиники.
Артритную форму отличают от:
травматического артрита, инфекционного артрита вызванного микоплазмозом.
Нервную форму отличают у козлят от: прогрессивного парезы, энзоотической атаксии, спинномозговых форм гельминтозов (нематоды, вертячка), травм спинного мозга или абсцессов, а также врожденных аномалий спинного мозга и позвоночника; у взрослых коз нервную форму еще отличают от листериоза, бешенства и полиэнцефаломиелита.
Легочную форму отличают от казеозного лимфаденита. Маститную форму от туберкулезного мастита.
Лечение не разработано. Вакцин нет. Селекция на устойчивость к вирусу пород мало изучена.
Меры борьбы и профилактика.
АЭК относится к группе болезней, подлежащих обязательной регистрации (заявке) в МЭБ (Международное Эпизоотическое Бюро), независимо от формы течения и проявления болезни (клиническая, латентная) и метода диагностики (серологический, биофизический). Согласно
ветеринарно-санитарным правилам, принятым в зарубежных странах, при возникновении болезни вводится карантин с сопутствующими мероприятиями предосторожности на границе и внутри страны.
Меры борьбы:
1. Регулярное проведение лабораторных исследований всего стада — 1-2 раза в год. Козлят можно начинать исследовать с 6 месячного возраста. Нельзя исследовать беременных, больных животных или сразу после вакцинации (не менее 30 дней после введения любых вакцин).
2. Выпаивание козлят молозивом здоровых коз или простерилизованным молозивом или их заменителями. Пастеризация молозива — при температуре +59 град в течении 60 минут, чтобы инактивировать вирус. Рекомендуется использовать водяную баню или пароварку для точной регулировки температуры. Большое количество молозива можно после пастеризации
замораживать небольшими порциями (разовая порция выпаивания). При нагревании выше +59 градусов, полезность молозива будет значительно снижена из-за денатурации белков, в том числе антител.
3. Единственное эффективное средство борьбы — убой всех животных в неблагополучных и подозреваемых в неблагополучии хозяйствах, поскольку специфические меры профилактики не разработаны. Кроме того, появление этой болезни ведет к ограничениям при экспорте и импорте племенного поголовья.
4. Метод изолированного выращивания козлят от сероположительных коз — при родах не допустить контакта козленка с матерью, ее калом, мочой и подстилкой. Не дать козе облизать козленка. То есть принять козленка в чистые руки и унести его в карантинный блок и там уже проводить остальные манипуляции.
5. Дезинфекция фенольными соединениями и соединениями четвертичного аммония.
6. Использовать козлов-производителей (или сперму) с отрицательными результатами за 30 дней до сбора спермы или случки или проверенных козлов-производителей.
7. При выявлении положительного результата, повторно исследовать можно не раньше чем через 2 недели. После 3-х лет стабильно отрицательных результатов можно утверждать что ферма чистая.
8. Создание «сероположительных» изолированных стад с особо ценными племенными животными для получения от них потомства. Граница между группами должна быть не менее 2-х метров, а лучше 3-4 метра.
9. Предупредить занос возбудителя инфекции в хозяйство, необходимо пополнять поголовье только из тех стад, в которых в течение последних нескольких лет не было зарегистрировано клинических случаев заболевания, не выявлены серопозитивные животные и не было поступления новых коз.
Экономический ущерб при этом складывается в основном из выбраковки из стад клинически больных животных и вирусоносителей, а также недополучении молока.
Высокие факторы риска развития АЭК:
1. Кормление козлят смешанным молоком (от нескольких коз).
2. Плохая гигиена.
3. Смешение коз из разных хозяйств без карантина и анализов, а также выставки и места продаж.
4. Скученность.
5. Использование непроверенного персонала (особенно дояров)
6. Общее доение непроверенных коз.
Источник
Мир заботливо и с любовью держит меня в своих ладонях, одаривая, согревая, сохраняя,защищая, ограждая и взращивая
Источник