Антинуклеарные антитела при ревматоидном артрите

· Клинический анализ крови (c лейкоцитарной формулой);

· Скорость оседания эритроцитов (СОЭ);

· Фибриноген;

· Антистрептолизин О;

· Мочевая кислота в сыворотке;

· С-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью);

· Ревматоидный фактор (РФ);

· Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках;

· Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Метод исследования

· Проточная цитофлуориметрия: Клинический анализ крови (c лейкоцитарной формулой);

· Метод капиллярной фотометрии: СОЭ;

· Клоттинговый метод (детекция бокового светорассеяния, определение процента по конечной точке): Фибриноген;

· Иммунотурбидиметрия: Антистрептолизин О, С-реактивный белок, Ревматоидный фактор;

· Ферментативный колориметрический метод: Мочевая кислота;

· Непрямая реакция иммунофлюоресценции: Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках;

· Иммуноферментный анализ: Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин).

• В течение суток до исследования не употреблять алкоголь, а также лекарственные препараты (по согласованию с врачом);
• Не принимать пищу в течение 12 часов перед анализом;
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования;
• Не курить 3 часа до исследования

Общая информация об исследовании

Боли в суставах могут быть признаком артрита, в том числе ревматоидного, артроза, остеоартроза, подагры, хондрокальциноза, болезни Бехтерева и других заболеваний.

Воспаление суставов также может быть вызвано инфекционными или системными заболеваниями: грипп, скарлатина, туберкулез, гонорея, хламидиоз, а также хроническим очагом инфекции, вызванной стафилококками или стрептококками. В основе многих заболеваний суставов лежит воспалительный процесс, который становится причиной нарушений подвижности со стороны опорно-двигательной системы.

Воспаление является биохимической защитной реакцией организма в ответ на повреждение тканей, может носить как острый, так и хронический характер. Так, например, при ревматоидном артрите процесс системного хронического воспаления сопровождается повышением скорости оседания эритроцитов (СОЭ) и концентрации таких острофазных белков, как фибриноген и С-реактивный белок. Фибриноген является одним из факторов, известных под названием «ревматические пробы». Уровень фибриногена резко возрастает в крови при воспалении или повреждении ткани.

Антистрептолизин-О является одним из лабораторных маркеров ревматизма, применяется для дифференциальной диагностики ревматизма и ревматоидного артрита (в случае РА уровень антистрептолизина-О значительно меньше).Повышение данного показателя свидетельствует о сенсибилизации организма к стрептококковым антигенам.

Повышенное содержание мочевой кислоты является одним из признаков подагры, ревматизма, артрита и других нарушений. Если скорость синтезирования мочевой кислоты превышает скорость ее выведения из организма, нарушается процесс пуринового обмена. Задержка этого вещества в организме влияет на деятельность почек, развивается почечная недостаточность, влекущая за собой воспаления суставов, при котором кристаллы мочевой кислоты откладываются в суставной (синовиальной) жидкости.

Ревматоидный фактор (РФ) входит в список стандартных критериев ревматоидного артрита, установленных Американской ассоциацией ревматологов (AAR). Определяется у 75-80 % больных ревматоидным артритом, однако не является специфичным для ревматоидного артирита, а указывает на наличие подозрительной аутоиммунной активности. Его также обнаруживают при синдроме Шегрена, склеродермии, дерматомиозитах, гиперглобулинемиях, В-клеточных лимфопролиферативных заболеваниях. Около 30 % пациентов с системной красной волчанкой (СКВ), не имеющих признаков ревматоидного артрита, РФ-позитивны. Чувствительность РФ к ревматоидному артриту составляет всего 60-70 %, а специфичность 78 %.

Ревматоидный фактор — это антитела против фрагментов иммуноглобулина класса G (IgG). Чаще (до 90 % случаев) эти антитела относятся к иммуноглобулинам класса М (IgM), редко встречаются IgG, IgA, IgE. Несмотря на низкую специфичность, наличие РФ считается важным прогностическим признаком для исхода ревматоидного артрита.

Антинуклеарные антитела (другое название — антинуклеарный фактор) — гетерогенная группа антител, реагирующих с различными компонентами клеточного ядра. У здорового человека с нормальным иммунитетом антинуклеарных антител в крови быть не должно или их уровень не должен превышать установленные референсные значения. Утрата ряда легкорастворимых компонентов из ядра клеток НЕр-2 (стандартизованные клетки, которые используют при проведении анализа) или их перераспределение в цитоплазму может явиться причиной выявления низких титров антинуклеарного фактора на клеточной линии НЕр-2.

Целесообразно совместно с определением антинуклеарного фактора использовать определение специфичности антинуклеарных антител, что позволяет избежать ложноотрицательных результатов при системных ревматических заболеваниях. Под определением «специфичность антинуклеарных антител» понимают определение аутоантител к конкретным антигенам, для чего используют определение экстрагируемого ядерного антигена (ENA-скрин). ЕNА представляет собой легко растворимые компоненты ядра клетки. В данный тест входят антигены RNP-70, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, центромерный белок В и Jo-1, причем ряд из них получают рекомбинантным методом.

Благодаря высокой чувствительности, составляющей 95-98 %, комбинированное применение двух тестов позволяет проводить как раннюю диагностику системных заболеваний, так и уточнение диагноза системного заболевания при неясной клинической картине.

Специфичность ENA-скрининга несколько уступает специфичности исследования на антитела группы ENA посредством метода иммуноблота. Этот факт имеет особое значение в случае обследования лиц с подозрением на наличие системной красной волчанки, а также смешанного заболевания соединительной ткани. С учетом этого при положительном результате ENA-скрининга выполняется дополнительное подтверждающее исследование — иммуноблот.

Обнаружение антител указывает на наличие аутоиммунного нарушения, однако не указывает конкретное заболевание, поскольку тест является скрининговым исследованием. Цель любого скрининга — выявить людей с повышенным риском того или иного заболевания.

Для чего используется исследование?

• Дифференциальная диагностика артритов;
• Диагностика системных аутоиммунных заболеваний;
• Для диагностики ревматоидного артрита и синдрома Шегрена, а также для отличия их от других форм артрита и заболеваний со сходными симптомами.

Когда назначается исследование?

• При симптомах аутоиммунного заболевания (длительное повышение температуры, боли в суставах, усталость, потеря массы тела, изменение кожных покровов);
• При выявлении изменений, характерных для системных заболеваний соединительной ткани (повышение СОЭ, уровня С-реактивного белка, циркулирующих иммунных комплексов);
• При ревматоидном артрите (определение активности процесса, прогноз и контроль лечения заболевания);
• При подозрении на подагру (главный симптом — боли в суставах, чаще всего в большом пальце стопы);
• При нaличии утpeннeй cкoвaннocти или тугoпoдвижнocти cуcтaвoв.

Что означают результаты исследования?

Для постановки диагноза важно использовать комплексное обследование, которое включает в себя лабораторную диагностику, клинические данные и современные методы инструментального обследования суставов: КТ, МРТ, УЗИ.

Клинический анализ крови (c лейкоцитарной формулой)

Референсные значения: расшифровка общего анализа крови (см. подробное описание)

Лейкоцитарная формула обычно интерпретируется в зависимости от общего количества лейкоцитов. Если оно отклоняется от нормы, то ориентирование на процентное соотношение клеток в лейкоцитарной формуле может приводить к ошибочным заключениям. В этих ситуациях оценка производится на основании абсолютного количества каждого вида клеток (в литре — 1012/л — или микролитре — 109/л).

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/02-005#subj12

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Референсные значения:

При артрите четко выражена воспалительная картина крови с резким повышением СОЭ до 40-80 мм.

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/02-007#subj12

Фибриноген

Референсные значения: 1,8 — 3,5 г/л

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/03-011#subj12

Антистрептолизин О

Референсные значения:

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/06-007#subj12

Мочевая кислота в сыворотке

Референсные значения:

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/06-033#subj12

С-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

Референсные значения: 0 — 5 мг/л

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/06-182#subj12

СРБ больше 10 мг/л свидетельствует об остром воспалении, хроническом заболевании, травме и т. д. При вирусных инфекциях, метастазах, вялотекущих хронических и некоторых системных ревматических заболеваниях концентрация СРБ составляет 10-30 мг/л; при бактериальных инфекциях, обострении некоторых хронических воспалительных заболеваний (например, ревматоидного артрита) и повреждении тканей (хирургическая операция, острый инфаркт миокарда) — 40-100 мг/л (иногда 200 мг/л), при тяжелых генерализованных инфекциях, ожогах и сепсисе — до 300 мг/л и более.

Ревматоидный фактор

Референсные значения:

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/13-020#subj12

Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках

Референсные значения:титр антител, не превышающий значение 1:160 считается отрицательным

Положительный результат: титр антител 1:320 и более

• Отрицательный результат у пациента с признаками аутоиммунного процесса не исключает наличия аутоиммунного заболевания;
• ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (10-37 % в возрасте старше 65 лет);
• При положительном анализе на антинуклеарные антитела необходимо провести иммуноблот антинуклеарных антител для уточнения типа аутоиммунного заболевания и постановки диагноза.

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/13-045#subj12

Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)

Референсные значения: отрицательно

При назначении иммуносупрессивной терапии результат анализа может быть отрицательным.

Подробнее о результатах: https://www.helix.ru/kb/item/13-046#subj12

Что может влиять на результат?

• Уремия может приводить к ложноотрицательному результату ANA-анализа;
• Многие лекарственные препараты ассоциированы с развитием лекарственной волчанки и появлением ANA в крови;
• Некоторые препараты понижают уровень фибриногена: стероидные анаболические средства, фенобарбитал, стрептокиназа, урокиназа, а также вальпроевая кислота;
• Ложноотрицательные результаты при анализе антистрептолизина О могут наблюдаться при нефротическом синдроме, а также лечении кортикостероидами и некоторыми антибиотиками; к завышенным показателям приводят гиперхолестеринемия и заболевания печени;
• Стресс, сильная физическая нагрузка, рацион, богатый пуринами, анаболические стероиды, никотиновая кислота, эпинефрин, тиазидные диуретики, бета-адреноблокаторы, фуросемид и некоторые другие лекарственные вещества могут приводит к ложнозавышенным результатам уровня мочевой кислоты;
• Частота ложнопозитивных результатов теста на ревматоидный фактор повышается с возрастом пациента.



Кто назначает исследование?

Ревматолог, иммунолог, ортопед, невропатолог, терапевт.

[13-007] Антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA), IgG

[13-014] Антитела к циклическому цитруллинсодержащему пептиду, IgG

[13-026] Антитела к цитруллинированному виментину (анти-MCV)

[13-063] Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот

[20-024] Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК)

Литература:

1. Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клинические рекомендации / БХМ, М. — 2006.

2. Ревматология: Национальное руководство / под ред. Е.Л. Насонова, В.А. Насоноовой. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. — 720 с.

3. Клиническая ревматология (руководство для практических врачей) / под ред. члена-корресподента РАМН профессора В.И. Мазурова. — СПб.: ООО «Издательство Фолиант», 2001. — 416 с.

Источник